Regeneration of peanut (Arachis hypogaea) plantlets by in vitro culture of immature leaves

L. A. Mroginski, K. K. Kartha, and J. P. Shyluk

Abstract: The in vitro regeneration of buds, shoots, and roots from immature leaves of 3- to 5-day-old peanut (Arachis hypogaea L. cv. Colorado Manfredi) seedlings was studied under defined nutritional, hormonal, and environmental conditions. The first two leaves (2–5 mm in length) removed from aseptically germinated seeds were cultured on Murashige and Skoog medium containing vitamins as in B5 medium and 0.8% agar, supplemented with 12 combinations of naphthaleneacetic acid (NAA) (0.01 to 4 mg/L) and benzyladenine (BA) (1 and 3 mg/L). Bud regeneration occurred in all hormone combinations, but the maximum number of buds was regenerated at a concentration of 1 mg/L each of NAA and BA. Although bud regeneration was maximum with 2- to 5-mm-long leaflets, some success was also obtained with leaflets 8–13 mm long. However, no buds were regenerated when fully expanded leaflets were cultured.

Development of buds into shoots was readily achieved by transferring regenerated buds into fresh medium containing 0.01 mg/L NAA and 1 mg/L BA. A few roots were induced to grow when callus with buds was also transferred to medium devoid of hormones. So far, bud regeneration from immature leaves has been induced in vitro in 5 of the 10 cultivars tested.

Résumé : La régénération in vitro de bourgeons, de tiges et de racines à partir des feuilles immatures de plantules d'arachide (Arachis hypogaea L., cv. Colorado Manfredi) âgées de 3 à 5 jours a été étudiée dans des conditions nutritionnelles, hormonales et environnementales définies. Les deux premières feuilles (2–5 mm de longueur) excisées de graines ayant germé aseptiquement ont été cultivées sur le milieu MS contenant les vitamines du milieu B5 et 0,8% de gélose, additionné de 12 combinaisons de acide naphtalène acétique (ANA) (0,01 à 4 mg)/L) et de benzyladénine (BA) (1 et 3 mg/L). La régénération de bourgeons a lieu avec toutes les combinaisons hormonales, mais le nombre maximum de bourgeons régénérés se rencontre avec le ANA et le BA à la concentration de 1 mg/L chacun. La régénération de bourgeons est maximale à partir des folioles de 2 à 5 mm de longueur, mais elle se produit aussi à partir des folioles ayant 8–13 mm de longueur. Cependant, aucun bourgeon ne se régénère lorsqu'on met en culture des folioles ayant atteint leur pleine grosseur.

Le développement des bourgeons en tiges s'accomplit facilement en repiquant les bourgeons régénérés sur un milieu frais contenant 0,01 mg/L de ANA et 1 mg/L de BA. Quelques racines se développent lorsque les cals bourgeonnés sont repiqués sur un milieu dépourvu d'hormones. Jusqu'à maintenant, la régénération de bourgeons à partir de feuilles immatures a été induite in vivo chez 5 des 10 cultivars expérimentés.

[Traduit par le journal]