Comparison of a nested polymerase chain reaction – restriction fragment length polymorphism method, the PATH antigen detection method, and microscopy for the detection and identification of malaria parasites

Richard Parkes, Teresa Lo, Quantine Wong, Judith L. Isaac-Renton, and Sean K. Byrne

Abstract: A nested polymerase chain reaction – restriction fragment length polymorphism (PCR–RFLP) method, the PATH antigen detection method, and light microscopy were compared for their capacity to detect and identify Plasmodium species. One hundred and thirty-six blood specimens obtained from patients suspected of having malaria were examined by each of the three methods. Forty-four specimens were positive for malaria using microscopy as the "gold standard". The sensitivity for nested PCR was 100%, and the specificity was 98%. For the detection of Plasmodium falciparum, the antigen detection method had a sensitivity of 100% and a specificity of 97%. Species identification obtained using PCR–RFLP was identical or superior to light microscopy in 42 cases (96%). Although the nested PCR–RFLP method was more sensitive and specific, the rapid turnaround time and high sensitivity of the antigen detection method makes it a useful adjunct to standard microscopy.

Key words: malaria, PCR–RFLP, antigen detection.

Résumé : Les capacités de détecter et d'identifier les espèces de Plasmodium par une méthode de PCR–RFLP niché, par la méthode de détection d'antigènes PATH et par la microscopie optique ont été comparées. Cent trente-six spécimens de sang obtenus de patients soupçonnés d'avoir la malaria ont été analysés à l'aide de chacune des trois méthodes. Quarante-quatre spécimens étaient positifs pour la malaria tel que déterminé par microscopie optique en tant que méthode de référence. La sensibilité du PCR niché était de 100 % et sa spécificité était de 98 %. Pour la détection de Plasmodium falciparum, la méthode de détection d'antigènes avait une sensibilité de 100 % et une spécificité de 97 %. L'identification des espèces obtenue par PCR–RFLP était identique ou supérieure à la microscopie optique dans 42 cas (96 %). Bien que le PCR–RFLP niché était plus sensible et spécifique, les délais plus courts et la sensibilité élevée de la méthode de détection d'antigènes en font un complément utile à la microscopie classique.

Mots clés : malaria, PCR–RFLP, détection d'antigènes.

[Traduit par la Rédaction]